So sánh coombs trực tiếp và gián tiếp năm 2024

More Related Content

What's hot

What's hot (20)

Similar to COOMBS TEST

Similar to COOMBS TEST (9)

More from Trần Đương

More from Trần Đương (20)

Recently uploaded

Recently uploaded (20)

COOMBS TEST

• 1. và IgG IgM IgG Thường là kháng thể lạnh. Ngoại lệ: Trong nhóm máu ABO có KT antiA,B,AB là IgM – IgM này có khả năng hoạt động nhiệt độ phòng lẫn nhiệt độ cơ thể. Thường là kháng thể nóng (T cơ thể -> phản ứng thông qua IgG nguy hiểm hơn IgM Thường “hình thành tự nhiên” – tức là không qua truyền máu/mang thai – Naturally occurring KT hình thành đòi hỏi có sự tiếp xúc – Require exposure KT không có ý nghĩa KT có ý nghĩa – tức là nó sẽ gây ra phản ứng TM tán huyết trên lâm sàng. Pentamer - Có kn kết nối nhiều HC với nhau -> ngưng kết. - Ngưng kết xong IgM có kn gây tán huyết do khả năng cố định bổ thể rất mạnh. => Nếu bất đồng ABO rất nguy hiểm do tán huyết nội mạch rất mạnh. Monomer - Khả năng tạo được ngưng kết HC thấp. - Khả năng cố định bổ thể để gây tán huyết cũng thấp. Bất đồng hệ thống nhóm máu khác hầu hết là IgG - KT chỉ phủ lên HC chứ chưa có khả năng gây ngưng kết cũng như tán huyết. - HC bị phủ KT này đi qua hệ võng nội mô như gan, lách, hạch… mảnh Fc trên KT lồi ra bị bắt bởi đại thực bào -> tiêu hủy theo cơ chế đại thực bào gây tán huyết ngoại mạch. IgM có kn hoạt động ở nhiệt độ phòng nên nếu có bất thường ABO -> có thể thấy hiện tượng ngưng kết bằng mắt thường khi định nhóm máu tại giường. IgG (hệ nhóm máu còn lại) ko có kn hoạt động ở nhiệt độ phòng -> ko thấy hiện tượng ngưng kết khi định nhóm máu tại giường. Coombs Test: Làm sao thấy được bất đồng nhóm máu các hệ ngoài ABO? 2. Coombs trực tiếp và Coombs gián tiếp Coombs trực tiếp Coombs gián tiếp Term khác: Sàng lọc kháng thể bất thường # antibody screening test Lấy HC bn đi xét nghiệm Lấy serum bn đi xét nghiệm Thực hiện test coombs cần: To 37; AHG
• 2. trọng của miển dịch cơ thể: Không bao giờ KT của cơ thể gắn lên KN chính cơ thể mình Phát hiện KT gắn lên HC của chính bn. => Nó phải là một bệnh tự miễn. Trường hợp KT ko phải của bn nhưng nó gắn lên HC bn như trong truyền nhầm nhóm máu => Nó không phải là bệnh tự miễn. Phát hiện KT bất thường lưu hành trong huyết tương bn: KT này có thể gắn/ko gắn trên bề mặt HC. - Nếu KT này gắn lên bề mặt HC/ bn ko truyền máu, ko mang thai -> bệnh lý tự miễn. Coombs GT dương tính trong bối cảnh Coombs TT dương tính. - Nếu KT này ko gắn lên bề mặt HC, sinh ra do một đáp ứng md của cơ thể đối với KN lạ -> đồng nghĩa nó sẽ là dị kháng thể. Coombs GT dương tính đơn độc trong 2 bối cảnh or bn đã được truyền máu or bn đã mang thai. 2 trường hợp dễ nhầm lẫn: (1) Truyền nhầm nhóm máu: - Truyền HC là KN lạ vào cơ thể, cơ thể sinh ra dị KT chống lại KN lạ này -> Coombs GT dương tính (Lúc này KT là của cơ thể không bám lên bề mặt HC của bản thân bn). Coombs TT (-/+) vì còn tùy vào khối HC truyền vào có kèm KT bất thường bám lên bề mặt HC bn ko. - Truyền KT lạ vào cơ thể, KT này bám lên bề mặt HC -> Coombs TT dương tính: Truyền HC ko rửa, Truyền huyết tương, Truyền HC rửa nhưng còn KT. (2) Bất đồng nhóm máu mẹ con (hệ Rh) - Mẹ: Coombs GT dương tính đơn độc. - Con: Coombs TT dương tính; Coombs GT dương tính luôn. Do antiD từ mẹ truyền sang là KT lạ lưu hành trong máu, gắn lên bề mặt HC gây tán huyết. Coombs GT (+): Mẹ có KT bất thường trong máu là IgG qua được hàng rào nhau thai -> tấn công lên HC đứa bé. => Do vậy, giá trị lớn nhất của Coombs GT là trong việc nghiên cứu bất đồng nhóm máu mẹ con. - Dị kháng thể: Transfusion - KT mẹ xuyên qua hàng rào nhau thai truyền sang con - Autoantiboby: Đây là loại phổ biến nhất ta hay chẩn đoán là bệnh lý thiếu máu tán huyết tự miễn. - Drug-dependent antibodies: Các thuốc này có thể là haptens, uống vào làm hình thành KT mà KT này nhận nhầm KN nhóm máu, tương tự cơ chế tự miễn. - Non-immune mediated, non-immune binding of antibody – hypergammaglobulinemia: Tăng - (+) trong bối cảnh Coombs TT (+) - 2 bối cảnh ta cần phải điều tra: + BN thực sự đã truyền máu hay chưa ? + BN đã từng mang thai hay chưa ?
• 3. IgG một cách bất thường có thể gắn 1 cách ko đặc hiệu lên KN hồng cầu. - Passive antibody: KT từ bên ngoài truyền vào  Antibody in donor plasma reacting with recipient RBCs  Antibody in anti-thymocyte globuline: Đây là loại KT chống lại KN người cho nên nó có khả năng gắn trực tiếp lên các KN HC.  Antibody in IV-gammaglobulin

Nghiệm pháp Coombs là một thử nghiệm miễn dịch huyết học có vai trò quan trọng trong việc phát hiện các kháng thể không hoàn toàn có khả năng kết hợp với kháng nguyên tương ứng trên bề mặt hồng cầu nhưng không có khả năng gây ngưng kết hồng cầu.

2. Nguyên tắc của nghiệm pháp Coombs Nếu huyết thanh chứa các kháng thể không hoàn toàn được tiếp xúc với hồng cầu đã có sẵn kháng nguyên bám trên bề mặt thì sẽ xảy ra hiện tượng kết hợp kháng nguyên – kháng thể. Có 2 phương pháp được ứng dụng để phát hiện kháng thể không hoàn toàn: - Coombs trực tiếp: phát hiện kháng thể đã được cảm nhiễm trên bề mặt hồng cầu (tức là kháng thể đã được gắn lên bề mặt hồng cầu) - Coombs gián tiếp: phát hiện kháng thể không hoàn toàn lưu hành trong huyết thanh bệnh nhân.

3. Kỹ thuật thực hiện nghiệm pháp Coombs trên ống nghiệm 3.1. Nghiệm pháp Coombs trực tiếp

3.1.1. Chuẩn bị - Bệnh phẩm: bệnh phẩm máu đã được chống đông bằng EDTA, cùng giấy chỉ định làm nghiệm pháp Coombs trực tiếp. - Dụng cụ, trang thiết bị: kính hiển vi, máy ly tâm có số vòng và thời gian chính xác, ống nghiệm sạch, pipet, khay đựng bệnh phẩm, giá cắm pipet, cốc mỏ… - Sinh phẩm, hóa chất: huyết thanh Coombs, NaCl 0,9%, Hồng cầu chứng.

3.1.2. Tiến hành kỹ thuật:

- Ghi thông tin cần thiết của bệnh nhân lên ống nghiệm tiến hành Coombs trực tiếp. - Rửa sạch hồng cầu bệnh nhân (đến khi soi trên KHV thấy hồng cầu rời rạc) - Pha hồng cầu bệnh nhân 5% - Nhỏ vào ống nghiệm đã chuẩn bị 1 giọt hồng cầu bệnh nhân 5% và 2 giọt huyết thanh Coombs → Lắc trộn nhẹ nhàng. - Ly tâm chéo ở 1000 vòng/ 15 – 20 giây. - Đọc kết quả bằng mắt thường và kính hiển vi. + Nếu kết quả (+) → tiến hành kiểm tra lại kỹ thuật hoặc trả kết quả Coombs (+) + Nếu kết quả (-) → nhỏ thêm 1 giọt hồng cầu chứng và ly tâm chéo. Nếu sau ly tâm chéo (+) từ 2+ → 3+ chứng tỏ Coombs trực tiếp (-). Nếu kết quả ly tâm chéo (-) thì phải tiến hành kiểm tra lại chất lượng của kỹ thuật và các dụng cụ, sinh phẩm hóa chất.

3.2. Nghiệm pháp Coombs gián tiếp.

3.2.1. Chuẩn bị - Bệnh phẩm: bệnh phẩm máu được lấy vào ống không có chất chống đông để tách lấy huyết thanh. - Dụng cụ, trang thiết bị: kính hiển vi, máy ly tâm có số vòng và thời gian chính xác, ống nghiệm sạch, pipet, khay đựng bệnh phẩm, giá cắm pipet, cốc mỏ… - Sinh phẩm, hóa chất: huyết thanh Coombs, NaCl 0,9%, hồng cầu cảm nhiễm, hồng cầu chứng, dung dịch Liss.

3.2.2. Tiến hành kỹ thuật

- Ghi thông tin cần thiết của bệnh nhân lên ống nghiệm thực hiện nghiệm pháp Coombs gián tiếp. - Rửa hồng cầu cảm nhiễm O+ 3 lần bằng NaCl 0,9%. - Pha hồng cầu cảm nhiễm O+ 5% bằng NaCl. - Cho vào ống nghiệm đã chuẩn bị 1 giọt hồng cầu cảm nhiễm O+ và 2 giọt huyết thanh Coombs. - Bịt paraphin, ủ trong bình cách thủy 30 phút hoặc ủ trong 15 phút nếu nhỏ thêm dung dich Liss. - Sau đó tiến hành rửa 3 lần bằng NaCl. - Nhỏ thêm 2 giọt huyết thanh Coombs → Lắc trộn nhẹ nhàng - Ly tâm chéo ở điều kiện 1000 vòng / 15 – 20 giây. - Đọc kết quả bằng mắt thường và kính hiển vi. + Nếu kết quả (+) → tiến hành kiểm tra lại kỹ thuật hoặc trả kết quả Coombs gián tiếp (+) + Nếu kết quả (-) → nhỏ thêm 1 giọt hồng cầu chứng và ly tâm chéo. Nếu sau ly tâm chéo (+) từ 2+ → 3+ chứng tỏ Coombs gián tiếp (-). Nếu kết quả ly tâm chéo (-) thì phải tiến hành kiểm tra lại chất lượng của kỹ thuật và các dụng cụ, sinh phẩm hóa chất.

4. Một số khó khăn thực hiện nghiệm pháp Coombs

4.1. Một số nguyên tắc - Mẫu bệnh phẩm phải được ly tâm tách huyết thanh ngay. - Thử nghiệm cần phải được làm trong vòng 2 giờ. - Mẫu bệnh phẩm trước khi tiến hành xét nghiệm phải được để ở 37°C.

4.2. Một số khó khăn trong quá trình thực hiện - Tăng protein: bệnh nhân bị tăng protein tiềm tang hoặc trong huyết thanh một paraprotein (trong bệnh đa u tủy xương hoặc Wandestrom) - Hiện tượng đa ngưng kết: + Trong huyết thanh Coombs có ngưng kết tố đa giá + Sự gắn invivo của kháng thể đa giá ( có hoawcjkhoong có vai trò của bổ thể) có các immunoglobulin trong huyết thanh Coombs. - Sự bất thương của màng tế bào: không hấp phụ theo cơ chế miễn dịch các protein huyết thanh. - Hiệu lực của tế bào sợi võng - Các khó khăn để tinh khiết với Coombs bổ thể - Sự có mặt của 2 quần thể hồng cầu. - Thử nghiệm Coombs trực tiếp với tẻ dưới 3 tháng tuổi: do ở đây có sự có mặt của kháng thể của mẹ lưu hành trong huyết thanh con, có thể là kháng thể đồng loài chống D, c, Fya, K, Jka.

TranThiKhanhLinh Offline

Thành viên thử việc

Bài viết: 4 Chủ đề: 0 Gia nhập: Oct 2014 Danh tiếng:0

Thanks: 0 Given 0 thank(s) in 0 post(s)

Points: 0$

Hi o ky thuat coombs gian tiep Buoc: nho hong cau cam nhiem voi huyet thanh benh nhan moi dung chu nhi? Sao lai la nho ht coomb.. voi lai minh thay da nho hong cau cam nhiem roi thi chac chan phan ung phai duong tinh roi. Hi theo minh hong cau O+ la panel hong cau thi dung hon chu nhi

kykimquang1993 Offline

Thành viên thử việc

Bài viết: 1 Chủ đề: 0 Gia nhập: Jun 2015 Danh tiếng:0

Thanks: 0 Given 0 thank(s) in 0 post(s)

Points: 0$

Cho hỏi nếu làm xét nghiệm coombs ma máu tán huyết thì mình có xét là dương tính ko? mình làm nhiều mà chưa gap trường hợp này bao giờ

The lord of the rings Offline

Thành viên thử việc

Bài viết: 1 Chủ đề: 0 Gia nhập: Nov 2016 Danh tiếng:0

Thanks: 0 Given 0 thank(s) in 0 post(s)

Points: 0$

Cho em hỏi các bệnh lí có thể xảy ra khi XN cooms gián tiếp dương tính?

tuyenlab Offline

Administrator

Bài viết: 3,644 Chủ đề: 1,637 Gia nhập: Dec 2011 Danh tiếng:8

Thanks: 5 Given 91 thank(s) in 82 post(s)

Points: 29,750.32$

11-21-2016, 01:12 AM (Sửa đổi lần cuối: 11-21-2016, 01:13 AM bởi tuyenlab.)

(11-15-2014, 10:45 AM)TranThiKhanhLinh Đã viết: Hi o ky thuat coombs gian tiep Buoc: nho hong cau cam nhiem voi huyet thanh benh nhan moi dung chu nhi? Sao lai la nho ht coomb.. voi lai minh thay da nho hong cau cam nhiem roi thi chac chan phan ung phai duong tinh roi. Hi theo minh hong cau O+ la panel hong cau thi dung hon chu nhi

ĐÚng rồi bạn, bước đầu phải là nhỏ hồng cầu O với huyết thanh bệnh nhân để cho các kháng thể bất thường nếu có sẽ được cảm nhiễm lên hồng cầu O đó.

(06-11-2015, 10:01 PM)kykimquang1993 Đã viết: Cho hỏi nếu làm xét nghiệm coombs ma máu tán huyết thì mình có xét là dương tính ko? mình làm nhiều mà chưa gap trường hợp này bao giờ

Coombs trực tiếp thì không có tan máu. Còn Coombs gián tiếp nếu trong huyết thanh bệnh nhân có bổ thể thì có thể gây ly giải hồng cầu (tan máu). Do đó cần khử bổ thể trước khi ủ huyết thanh bệnh nhân với hồng cầu O. Khử ở 56o trong 30 phút.

(11-20-2016, 10:52 PM)The lord of the rings Đã viết: Cho em hỏi các bệnh lí có thể xảy ra khi XN cooms gián tiếp dương tính?

Coombs gián tiếp dương tính trong các trường hợp sau:

- Tăng nguyên hồng cầu bào thai. - Thiếu máu tan máu. - Bất đồng sau truyền máu ngoài hệ ABO. (bất đồng hệ thống nhóm máu khác). - Bất đồng nhóm máu Rh mẹ - con

tranthanhthanh Offline

Thành viên thử việc

Bài viết: 2 Chủ đề: 0 Gia nhập: May 2018 Danh tiếng:0

Thanks: 0 Given 0 thank(s) in 0 post(s)

Points: 0$

Dạ thưa thầy cho em hỏi hồng cầu chứng ở đây là gì ạ, tại sao bước kiểm tra cuối cùng khi cho hồng cầu chứng kết quả phải là 2+ đến 3+ ạ.

tuyenlab Offline

Administrator

Bài viết: 3,644 Chủ đề: 1,637 Gia nhập: Dec 2011 Danh tiếng:8

Thanks: 5 Given 91 thank(s) in 82 post(s)

Points: 29,750.32$

(05-22-2018, 11:13 AM)tranthanhthanh Đã viết: Dạ thưa thầy cho em hỏi hồng cầu chứng ở đây là gì ạ, tại sao bước kiểm tra cuối cùng khi cho hồng cầu chứng kết quả phải là 2+ đến 3+ ạ.

Hồng cấu chứng là hồng cầu đã được cảm nhiễm kháng thể miễn dịch IgG. Hồng cầu chứng phải đạt 2+ đến 3+ để đảm bảo huyết thanh coombs có hiệu lực

tranthanhthanh Offline

Thành viên thử việc

Bài viết: 2 Chủ đề: 0 Gia nhập: May 2018 Danh tiếng:0

Thanks: 0 Given 0 thank(s) in 0 post(s)

Points: 0$

(05-26-2018, 01:05 AM)tuyenlab Đã viết:

(05-22-2018, 11:13 AM)tranthanhthanh Đã viết: Dạ thưa thầy cho em hỏi hồng cầu chứng ở đây là gì ạ, tại sao bước kiểm tra cuối cùng khi cho hồng cầu chứng kết quả phải là 2+ đến 3+ ạ.

Hồng cấu chứng là hồng cầu đã được cảm nhiễm kháng thể miễn dịch IgG. Hồng cầu chứng phải đạt 2+ đến 3+ để đảm bảo huyết thanh coombs có hiệu lực

Dạ cảm ơn ạ, cho em hỏi thêm hồng cầu cảm nhiễm kháng thể miễ dịch đó mình phải mua phải không ạ, mình có thể tự pha được không ạ.

tuyenlab Offline

Administrator

Bài viết: 3,644 Chủ đề: 1,637 Gia nhập: Dec 2011 Danh tiếng:8

Thanks: 5 Given 91 thank(s) in 82 post(s)

Points: 29,750.32$

(05-29-2018, 09:32 AM)tranthanhthanh Đã viết:

(05-26-2018, 01:05 AM)tuyenlab Đã viết:

(05-22-2018, 11:13 AM)tranthanhthanh Đã viết: Dạ thưa thầy cho em hỏi hồng cầu chứng ở đây là gì ạ, tại sao bước kiểm tra cuối cùng khi cho hồng cầu chứng kết quả phải là 2+ đến 3+ ạ.

Hồng cấu chứng là hồng cầu đã được cảm nhiễm kháng thể miễn dịch IgG. Hồng cầu chứng phải đạt 2+ đến 3+ để đảm bảo huyết thanh coombs có hiệu lực

Dạ cảm ơn ạ, cho em hỏi thêm hồng cầu cảm nhiễm kháng thể miễ dịch đó mình phải mua phải không ạ, mình có thể tự pha được không ạ.

Mình cũng không biết là có nơi nào bán cài này không nữa. Bạn hoàn toàn có thể tự sản xuất bằng các ủ hồng cầu O Rh(+) với Anti D IgG để tạo hồng cầu cảm nhiễm.

Nhữ Phương Offline

Thành viên thử việc

Bài viết: 1 Chủ đề: 0 Gia nhập: May 2018 Danh tiếng:0

Thanks: 0 Given 0 thank(s) in 0 post(s)

Points: 0$

Thầy cho e hỏi ạ. Trong nghiệm pháp Coombs tại sao mình lại phải pha hồng cầu bệnh nhân/ cảm nhiễm ra 5% mà không phải 10 hay 20% hay là một số khác ạ? Và nếu mình li tâm 3000v/1 phút thì sẽ ảnh hưởng như thế nào ạ?